PCR實驗室傳遞窗設計要求【規範】

PCR實驗室傳遞窗設計要求【規範】

時間│▩✘:2021-1-28 編輯│▩✘:wps-admin

注│▩✘:由於2020年突發新冠▩•◕·▩,傳遞窗就出現了供不應求的局面▩•◕·▩,目前傳遞窗應用於各大醫院◕↟•、PCR實驗室◕↟•、病房等小物品的傳遞▩•◕·▩,目的是為了防止空氣對流◕↟•、避免交叉感染▩•◕·▩,同時傳遞窗內安裝有紫外線殺菌燈▩•◕·▩,起到很好的滅菌作用·╃。

PCR實驗室傳遞窗設計要求【規範】

內嵌式傳遞窗

1 ◕↟•、PCR實驗室平面佈局

PCR擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區域│▩✘:試劑貯存和準備區◕↟•、標本製備區◕↟•、擴增反應混合物配製和擴增區◕↟•、擴增產物分析區·╃。為避免交叉汙染▩•◕·▩,進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行▩•◕·▩,即只能從試劑貯存和準備區→標本製備區→擴增反應混合物配製和擴增區→擴增產物分析區·╃。 各實驗區之間的試劑及樣品傳遞應透過傳遞窗進行·╃。

PCR實驗室傳遞窗設計要求【規範】

PCR實驗室平面佈局 

2◕↟•、實驗室空調通風系統設計及壓力控制

PCR實驗室並沒有嚴格的淨化要求▩•◕·▩,但是為避免各個實驗區域間交叉汙染的可能性▩•◕·▩,宜採用全送全排的氣流組織形式·╃。同時▩•◕·▩,要嚴格控制送◕↟•、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求·╃。

2.1◕↟•、試劑貯存和準備區

該實驗區主要進行的操作為貯存試劑的製備◕↟•、試劑的分裝和主反應混合液的製備·╃。試劑和用於樣品製作的材料應直接運送至該區▩•◕·▩,不得經過其他區域·╃。試劑原材料必須貯存在本區內▩•◕·▩,並在本區內製備成所需的貯存試劑·╃。 對與氣流壓力的控制▩•◕·▩,本區並沒有嚴格的要求·╃。

PCR實驗室傳遞窗設計要求【規範】

2.2◕↟•、標本製備區

該區域主要進行的操作為樣本的儲存◕↟•、核酸(RNA◕↟•、DNA)提取◕↟•、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成·╃。 本區的壓力梯度要求為│▩✘:相對於鄰近區域為正壓▩•◕·▩,以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠汙染·╃。另外▩•◕·▩,由於在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的汙染▩•◕·▩,所以應避免在本區內不必要的走動·╃。

2.3◕↟•、擴增反應混合物配製和擴增區

該區域主要進行的操作為DNA擴增·╃。此外▩•◕·▩,已製備的DNA模板 (來自樣本製備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和製備區)製備成反應混合液等也可在本區內進行·╃。 本區的壓力梯度要求為│▩✘:相對於鄰近區域為負壓▩•◕·▩,以避免氣溶膠從本區漏出·╃。為避免氣溶膠所致的汙染▩•◕·▩,應儘量減少在本區內的不必要的走動·╃。個別操作如加樣等應在超淨臺內進行·╃。

2.4◕↟•、擴增產物分析區

該區域主要進行的操作為擴增片段的測定·╃。 本區是最主要的擴增產物汙染來源▩•◕·▩,因此對本區的壓力梯度的要求為│▩✘:相對於鄰近區域為負壓▩•◕·▩,以避免擴增產物從本區擴散至其它區域·╃。

3◕↟•、汙染的預防與控制

PCR實驗室設計的核心問題是如何避免汙染·╃。在實際工作中▩•◕·▩,常見的有以下幾種汙染型別│▩✘:擴增產物的汙染;天然基因組DNA的汙染;試劑的汙染以及標本間的汙染·╃。由於一旦發生汙染▩•◕·▩,實驗就必須停止▩•◕·▩,直到找到汙染源為止▩•◕·▩,而且實驗結果必須作廢▩•◕·▩,需重新進行實驗·╃。所以發生汙染後再圍繞實驗室來尋找汙染源不但耗時而且繁瑣▩•◕·▩,浪費人力物力·╃。因此要避免汙染▩•◕·▩,首先應是預防▩•◕·▩,而不是排除·╃。

3.1◕↟•、工作區域的嚴格劃分

(1)各個實驗區域設定合理;

(2)各個實驗區域要有明顯的標記(如醒目的門牌或不同的地面顏色等)▩•◕·▩,以避免各個不同實驗區域裝置物品◕↟•、試劑等發生混淆·╃。

3.2◕↟•、合理的系統設定

(1)合理的空調通風系統設定▩•◕·▩,儘量採用全送全排的空調系統;

(2)嚴格的氣流壓力控制▩•◕·▩,保證不同的實驗區內不同的壓力要求·╃。

3.3◕↟•、 規範的操作

(1)擴增檢驗實驗室的技術人員必須進行上崗培訓▩•◕·▩,經培訓合格後才能從事臨床基因擴增檢驗的工作;

(2)在實驗操作過程中▩•◕·▩,操作者必須戴手套▩•◕·▩,並經常更換·╃。此外▩•◕·▩,操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止汙染的措施;

(3)清潔工作及時◕↟•、正確·╃。實驗工作結束後▩•◕·▩,必須立即對本區進行清潔·╃。除常規的消毒液體對錶面進行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外▩•◕·▩,對一些實驗裝置還應進行高壓消毒處理·╃。

3.4◕↟•、嚴格的管理

(1)嚴格控制進出實驗室的人員·╃。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室▩•◕·▩,有條件的情況下要設定獨立的通道和進出整個實驗區的門;

(2)儘量減少在實驗區內不必要的走動以減少交叉汙染的可能性·╃。

(3)擴增產物分析區是最主要的擴增產物汙染來源▩•◕·▩,廢液不能在實驗室中傾倒▩•◕·▩,必須經消毒液浸泡消毒後在遠離實驗室的地方棄掉▩•◕·▩,用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒後統一處理▩•◕·▩,如焚燒等;

(4)擴增產物分析區可能會用到某些可致基因突變和有毒物質▩•◕·▩,應特別注意實驗人員的安全防護·╃。

3.5◕↟•、完備的實驗室配套設施

完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件▩•◕·▩,應根據各個實驗室實驗內容的不同配備相應的裝置和儀器▩•◕·▩,如超淨工作臺◕↟•、離心機◕↟•、互鎖傳遞窗◕↟•、加樣器等·╃。

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